细菌、放线菌、霉菌和酵母菌的区别与鉴定

春雨菌业

在液体菌种培养时，无论是何种培养基，除加有抑制剂外，一般三大类菌都有可能生长，所以应了解它们菌落特征的基本区别。本文部份资源来源于中国科学院微生物研究所科普网站。细菌

　　细菌是原核生物，为单细胞型生物，通过细胞分裂而增殖，具有原核生物增殖的特有方式二分裂这种无性繁殖的方式：一个细菌细胞细胞壁横向分裂，形成两个子代细胞。
　　细菌菌落较小，细胞球状（直径0.5～1.0μm），杆状（宽0.5～1.5μm，长1.0～4.0μm)。运动型细菌可以依靠鞭毛，细菌滑行或改变浮力来四处移动。另一类细菌，螺旋体，具有一些类似鞭毛的结构，称为轴丝，连接周质的两细胞膜。当他们移动时，身体呈现扭曲的螺旋型。螺旋菌则不具轴丝,但其具有鞭毛。
　　除镜检外也可采用牛肉膏琼脂培养基等培养鉴定。
　相关知识拓展阅读：　　细菌最主要的繁殖方式是二分裂，就是在细菌细胞生长到一定阶段时，一分为二，由一个细胞变成两个子细胞。细菌二分裂时，细胞中的遗传物质，即DNA先进行复制，然后在细胞的中央形成横隔壁，最后子细胞分裂，每个子细胞都具有一个DNA分子。

　　在少数细菌中，还存在着其它的繁殖方式，如不等二分裂、出芽繁殖、三分裂和多分裂等。不等二分裂是二分裂的变体形式，柄细菌的繁殖就是一个典型的例子。柄细菌的形态很有趣，它仅在一端生出一根鞭毛（细菌的运动“器官”）。繁殖前，在生鞭毛的一端长出一个柄，此时，鞭毛就消失了，之后，细胞伸长，在细胞的另一端长出一根鞭毛。细胞分裂后，形成形态不同的两个子细胞，一个有柄但无鞭毛，另一个只有鞭毛却无柄。有鞭毛的细胞生长到一定阶段，又开始上述的不等二分裂繁殖过程。
　　细菌在人工配制的固体培养基上生长、繁殖时，大量细胞以其母细胞为中心，聚集在一起形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群，称之为菌落，许多菌落连成一片时，则称之为菌苔。菌落可作为菌种鉴定和判断纯度的重要依据。
　　细菌的形态
　　细菌是单细胞生物，也就是说，一个细胞就是一个个体。细菌的基本形态有三种：球状、杆状和螺旋状，分别被称为球菌、杆菌和螺旋菌。

　　球菌大小以直径表示，多为0.5-1.0微米。根据分裂后细胞排列方式的不同进行分类。细胞分裂后，新个体分散而单独存在，是单球菌，如尿素微球菌（Micrococcus ureae）。两个细胞成对排列，是双球菌，如肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）。经两次分裂形成的四个细胞联在一起呈田字形，是四联球菌，如四联微球菌（Micrococcus tetragenus）。多个细胞排成链状，是链球菌，如乳链球菌（Streptococcus lactis）。细胞沿着三个互相垂直的方向进行分裂，分裂后的8个细胞叠在一起呈魔方状，是八叠球菌，如尿素八叠球菌（Sarcina ureae）。细胞无定向分裂，形成的新个体排列成葡萄串状，是葡萄球菌，如金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
　　杆菌的大小以宽度×长度表示，一般为0.2-1.25×0.5-5.0微米。分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等。菌体两端形态各异，如钝圆、平截或略尖等。各种杆菌的长度与直径比例差异很大，有的粗短，有的细长。杆菌是细菌中种类最多的，如大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtlis）等。
　　杆菌的大小以宽度×长度表示，一般为0.2-1.25×0.5-5.0微米。分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等。菌体两端形态各异，如钝圆、平截或略尖等。各种杆菌的长度与直径比例差异很大，有的粗短，有的细长。杆菌是细菌中种类最多的，如大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtlis）等。
　　螺旋菌大小一般为0.3-1.0×1.0-50微米，根据细胞弯曲程度和螺旋数目分为两种。若菌体弯曲不足一圈，似逗号形，称为弧菌，如霍乱弧菌（Vibrio cholerae）；菌体回转如螺旋状，则称为螺菌，如减少螺菌（Spirillum minus）。
　　除此之外，还有一些特殊形态的细菌，如长有附属丝的红微菌，丝状的亮发菌等。
　　细菌的结构
　　细菌细胞是原核细胞，就是在细胞中没有细胞核结构，只有明显核区（拟核），外面无核膜包围。与有真正细胞核的真核细胞相比，其它结构成分也有差异，如原核细胞壁的主要成分是一类含有氨基酸的多糖，称为肽聚糖，而真核细胞壁主要由纤维素或甲壳质组成。

　　细菌细胞的基本结构是一般细菌共有的结构，包括细胞壁、细胞质膜、拟核、细胞质。细胞壁是位于细胞最外面的一层坚韧而略具弹性的结构层，主要由肽聚糖构成，有固定外形和保护细胞等多种功能。
　　细胞质膜是紧贴在细胞壁内侧，包围细胞质的一层柔软且富有弹性的半透性薄膜，是重要的代谢活动中心，对于细菌的呼吸、能量的产生、运动、生物合成、内外物质的交换运送等均有重要的作用。
　　拟核位于细胞质内，是一种没有核膜、没有核仁、没有固定形态、结构也较简单的原始形态的核，其实质是一个大型环状的双链DNA分子，是负载细菌遗传信息的物质基础。
　　细胞质是由细胞质膜包围着的，除拟核以外一切透明、胶状、颗粒状物质的总称。具有维持细胞内环境平衡等多种功能，分散于细胞质中的核糖体颗粒是蛋白质合成的场所。
　　细菌细胞的特殊结构包括鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等，是某些细菌在某生长阶段具有的结构。鞭毛是某些细菌表面着生的一至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体，具有运动的功能。鞭毛在菌体上的着生位置、数目因种而异。菌毛（又名纤毛）是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬，且数量较多（250-300根）的丝状体，与细菌吸附或性结合有关。
　　荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质，它犹如穿在菌体表面的一件外套，用显微镜观察，中心部位是细菌菌体，在暗色背景下荚膜呈透明状环绕菌体，具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。
　　芽孢是某些细菌于生长后期，在细胞内形成的一个圆形、椭圆形或圆柱形的休眠体，能产生芽孢的多为杆菌，产芽孢母细胞的外壳称芽孢囊。芽孢在菌体内的位置、形状、大小因种而异，有中央位、端位、近端位等。芽孢直径大于或小于等于菌体宽度。芽孢具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性，堪称生命世界之最，所以有些细菌在环境条件不利于生长繁殖时便会形成芽孢。
　　细菌的繁殖

　　二分分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。

　

　　单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。细菌的菌落特征因种而异。
放线菌

　　菌落较细菌干燥，不光滑，与培养基结合较牢.菌丝细（宽约1.0μm），直径与细菌相仿，分枝不分隔，可扩展成放射状；一般有基内菌丝、气生菌丝和孢子丝之分，由孢子丝产生孢子。孢子的颜色、形状大小和菌丝体可溶性色素的有无等特征，是菌种鉴别的主要依据之一。
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放线菌菌落形态图

　　放线菌是一大类群具有分枝状菌丝体的原核微生物。最早（1875年）分离自人感染的泪腺中。因绝大多数放线菌具有发育良好的菌丝体，19世纪以前人们曾将放线菌归于真菌中。1916年前后，Waksman等人在研究土壤微生物时，才首次把这些微小的“真菌”或丝状细菌称为“放线菌”(Actinomycetes)，并详细描述了这些微生物。在1990年著名的生命三域分类系统建立后，放线菌被正式划分于细菌域、厚壁菌门、放线杆菌纲。

　　放线菌的特点

　　放线菌为革兰氏阳性细菌，细胞核无核膜包被，细胞DNA的G + C mol %含量高 （>50 %）。多数菌生长较缓慢，产生可深入培养基内的营养菌丝和生长在表面的气生菌丝，并形成无性孢子。由于孢子、气生菌丝和营养菌丝颜色不同，常使菌落正反面呈不同颜色。放线菌的菌落形态多干燥致密，不易被跳起。

霉菌

　　呈菌线体形态，是丝状真菌的通称。菌丝粗大，宽约4.0～8.0μm，无色透明或呈现各种鲜艳的颜色，有营养菌丝与繁殖菌丝之分。多数霉菌菌丝有分隔，为多细胞分枝丝状体。菌落形态较大，质地蔬松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌孢子及巨大的孢子囊。孢子成熟时使菌落表面呈粉末状或颗粒状。孢子颜色因种而异，常与霉菌的水溶性色素不一而形成菌落正反面呈现不同颜色.各种霉菌在一定的培养基上生长形成的菌落大小、形状、颜色等特征相对稳定，是霉菌鉴定的主要依据之一。
酵母菌

　　多数酵母菌菌落与细菌相似，但较大而厚，由于酵菌细胞比细菌的大，细胞内有许多分化的细胞品，细胞间隙含水量较少，不能运动，大多菌落较大、较厚、光滑、湿润、外观较稠、不透明，菌落颜色多为乳白色或矿烛色，少数干皱，呈红色或粉红色。一些不产假菌丝的其菌落更隆起、边缘极圆整；产假菌丝的其菌落较扁平，表面和边缘较粗糙。菌体直径4～10μm，圆形、椭圆形、卵形、柠檬形、黄瓜形等，在液体培养中酵母菌体生长常会生成沉淀或形成菌膜。这些都是菌种鉴定的依据。
　　a.形态观察：酵母是不运动的单细胞真核生物，通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。大多数酵母菌以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。
　　b.死活鉴定：美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色
　延伸阅读：　　真核微生物是一大类具有真正细胞核，具有核膜与核仁分化的较高等的微生物，细胞内有线粒体等较复杂的细胞结构。这类微生物包括酵母菌、霉菌、微细藻类、原生动物和大型真菌等。

　　酵母菌是一类单细胞的真核微生物的通俗名称。其繁殖方式包括无性繁殖和有性繁殖。无性繁殖方式包括芽殖和裂殖。
　　芽殖是酵母菌最普遍的繁殖方式。其过程是：成熟的母细胞在其形成芽体的部位长出芽细胞，芽细胞脱离母体，成为新的个体细胞。如果不脱离母细胞，又长出新芽，子细胞就和母细胞连接在一起，形成藕节状或竹节状的细胞串，称为假菌丝或真菌丝。少数酵母以裂殖方式进行繁殖，当母细胞长到一定大小时，细胞核开始分裂，之后，在细胞中间产生一隔膜，将细胞一分为二。还有些酵母菌可形成一些无性孢子如节孢子、掷孢子、厚垣孢子等。有性繁殖则是通过形成子囊和子囊孢子。
　　酵母菌的形态及结构
　　酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1-5微米×5-30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。

　　酵母菌具有典型的真核细胞结构，有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。
　　酵母菌的繁殖
　　酵母菌有多种繁殖方式，有人把只进行无性繁殖的酵母菌称作“假酵母”，而把具有有性繁殖的酵母菌称作“真酵母”。
　　酵母菌的无性繁殖有芽殖和裂殖两种方式。

　　酵母菌最常见的无性繁殖方式是芽殖。芽殖发生在细胞壁的预定点上，此点被称为芽痕，每个酵母细胞有一至多个芽痕。成熟的酵 母细胞长出芽体，母细胞的细胞核分裂成两个子核，一个随母细胞的细胞质进入芽体内，当芽体接近母细胞大小时，自母细胞脱落成为新个体，如此继续出芽。如果酵母菌生长旺盛，在芽体尚未自母细胞脱落前，即可在芽体上又长出新的芽体，最后形成假菌丝状。

　　裂殖是少数酵母菌进行的无性繁殖方式，类似于细菌的裂殖。其过程是细胞延长，核分裂为二，细胞中央出现隔膜，将细胞横分为两个具有单核的子细胞。

　　酵母菌是以形成子囊和子囊孢子的方式进行有性繁殖的。两个临近的酵母细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、融合，并形成一个通道，两个细胞核在此通道内结合，形成双倍体细胞核，然后进行减数分裂，形成4个或8个细胞核。每一子核与其周围的原生质形成孢子，即为子囊孢子，形成子囊孢子的细胞称为子囊。