红菇属两种凝集素的分离纯化与比较研究

春雨菌业

　　以红菇属大白菇Russula delica和美丽红菇Russula lepida子实体为材料，利用离子交换柱层析、凝胶过滤层析的手段，分离获得新的凝集素RDL和RLL。结合凝胶过滤层析和SDS-PAGE的手段，确定RDL和RLL分别是分子量为60kDa和32kDa的双亚基蛋白，其N-末端部分氨基酸序列分别为GLKLAKQFAL和VWYIVAIKTDVPRTT。性质研究表明，RDL在20－70℃、低于25mmol/L HCl或12.5mmol/L NaOH下稳定，其凝集活性可以被邻硝基苯酚-β-D呋喃型半乳糖苷（25mmol/L）和菊糖（50mmol/L）所抑制；RDL具有抑制人肝癌Hep G2和人乳腺癌MCF7细胞增殖以及HIV-1反转录酶（RT）的活性，其半抑制浓度IC50分别为0.88μmol/L、0.52μmol/L和0.26μmol/L。RLL在20－70℃、低于12.5mmol/L HCl或NaOH下稳定，其凝集活性可以被菊糖（25mmol/L）和邻硝基苯酚-β-D呋喃型半乳糖苷（100mmol/L）所抑制；RDL具有抑制人肝癌Hep G2和人乳腺癌MCF7细胞增殖的活性，其半抑制浓度IC50分别为1.60μmol/L和0.90μmol/L，但不具有抑制HIV-1 RT的活性。