平菇的孢子分离与菌种复壮技术

春雨菌业 · 发表于 2012-3-26 16:57:35

　一般情况下，同一平菇品种经过4年以上的栽培就会或多或少的表现出一些退化的现象。诸如出菇迟、长势弱、转潮慢、产量不高等等。通过对平菇进行有性繁殖是解决种性退化的一条有效途径。由于平菇子实体孢子弹射量较多，接种操作相对简易，在栽培户中推广孢子分离提纯复壮技术是可行的。　　母种孢子分离与接种
　　1、采菇
　　选择菇体形态好、生长势健壮、能代表该品种性状接近成熟的平菇子实体，采摘一丛或两丛作为分离复壮用种菇拿回室内备用。要求所采的子实体菌盖边缘稍卷或已接近平展（编者注：一般来说组织分离的子实体在7、8成成熟即可；而孢子分离的要成熟一点，否则无法弹射孢子）。
　　2、装置与灭菌
　　用0.2％新洁尔灭清洗干净3个1000毫升烧杯和3个培养皿，烘干水分后将培养皿放入烧杯底部。切取菌盖长达7－9厘米上层或中层的一朵平菇子实体，用药棉蘸75％酒精轻擦菌盖和菌柄后，将菌褶朝下放入烧杯中的培养皿中如有插菇钢丝架更好。此操作完成后在烧杯口沿上盖好用无菌水滴湿的4层沙布，上面再盖一层白纸，用皮筋扎口，以次类推连同3个同样处理的烧杯一起放入接种箱。接种箱中另放入30－40支PDA试管培养基，接种铲、镊子酒精灯等工具，用10毫升甲醛加6克高锰酸钾混合后对接种箱进行熏蒸消毒灭菌。
　　3、接种与培养
　　放入接种箱用于孢子分离的平菇，经过8－12小时后就有孢子弹出，一般放置一昼夜培养皿中就有厚厚一层白色孢子印，这时要及时进行接种。接种时双手用75％酒精擦洗后就可进行。先取掉烧杯口上覆盖的纸和纱布，再用镊子夹出平菇体，取出培养皿用左手食指和母指夹住皿体，再取一支试管培养基用左手小指和无名指夹住。右手持接种铲竖着在酒精灯上灼烧进行干热灭菌，待冷却后用右手小指及鱼际拔出试管棉塞，用接种铲从培养皿中央铲取一些孢子接在试管培养基中央，随即塞上棉塞即可。一朵菇体弹射的孢子量可接种10支以上试管种。接种完成后贴上标签放入25℃左右的恒温箱中培养。培养过程中，前3－4天为孢子定植期，外表看不出任何变化，一周以后孢子开始萌发并在四周长出白色绒毛状菌丝体，16－18天左右菌丝布满培养基面，即得纯菌丝母种。如有污染管应及时弃除。
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　　原种扩接
　　选取10支菌丝洁白、粗壮、生长整齐的试管种进行原种的扩接。另20支纯菌丝母种等做完出菇试验后再作留种及相关处理。一支试管种可接5瓶原种，每支试管接完要进行火焰干热灭菌后再扩接另一支试管。接种完毕后取出菌种瓶放入25℃左右恒温箱培养，菌丝满瓶后10天左右进行出菇试验。
　　出菇试验
　　采用常规木屑或棉壳为主的培养基进行袋料栽培。一般接种10－20袋即可。接种后在适宜温度下发菌，菌丝长满后移到出菇最佳条件下进行观察。并选取菌丝生长速度快，吃料能力强、出菇早、朵形好、转潮快、产量高、质量好的平菇菌袋上的子实体再进行组织分离，然后选优作为生产用种。
　　为什么还要进行组织分离呢？这是由于孢子分离得到的母种，其中含有没有发生质配的单核菌丝，而单核菌丝是不能结实的，所以孢子分离得到的母种不能直接应用到生产中。

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