食用菌顶端菌丝复壮的机理及方法

春雨菌业

当我们获得一株性状优良的菌株后，都希望它能在较长的时间保持其亲本的优良特性，以不失其商业应用之价值，但常因转管、保存不当等种种原因，容易出现菌种（丝）老化的现象。采取何种措施使其恢复生机（复壮），办法固然多种多样，而顶端菌丝复壮法则不失为简便易行，效果明显的方法之一，除少数菌类（如银耳，茯苓等）外，香菇、木耳、侧耳、蘑菇、金针菇等多种食用菌均可用此方法进行复壮。　　丝状真菌的生长方式是以顶端延长的方式进行的，即菌丝体的生长点位于菌丝的顶端，根据泡囊学说认为在菌丝顶端区域内的细胞中由于顶端和亚顶端细胞间水电位势梯度作用的驱动（亦认为是细胞质的双相流动），使各种有利于生长的营养物质（蛋白质，多糖等）和酶的载体——泡囊，向顶端聚集，从而使菌丝靠近顶端的部位最具生命活力，采用移植靠近顶端部位的菌丝的方法，即可获得生命力较旺盛的菌丝群体，达到恢复生机的目的，具体做法妇下：
　　一、培菌器材
　　采用平皿作培菌容器为好，目前有些人用试管替代平皿，不仅操作上不太方便，对菌丝的选择亦受到限制。
　
　　二、培养基配制
　　一般采用PDA或PSA培养基即可，也可在上述基础上加入其它养分组成加富培养基，如复壮木腐菌类食用菌时，可按1～3%的比例加入相应树种的细太屑，与马铃薯混煮过滤，由于培养基中含有丰富的纤维素，半纤维索，木质素等物质，这对激活和增加菌丝中的相应酶的活力及数量很有好处。
　　三、操作：
　　（一）消毒灭菌
　　把配制好的培养基装入锥形瓶或其它容器中，用棉塞或6层纱布包扎好瓶口与平皿（用白纸包好），接种刀等用具用常规灭菌处理，与此同时，将接种箱进行空箱消毒，待灭菌结束，把培养基及各种器皿（器材）移入接种箱内，趁热将培养基倒入平皿中约二分之一高度，冷却后备用。
　　（二）转皿移接
　　用接种刀割取待复壮的试管种中接种点至边沿中心段菌丝一小块，移入平皿培养基的中心位置，每一菌丝应同时移接数个平皿，尔后把培养基仍用纸包好，写上标记置培养箱内恒温培育。
　　（三）复壮移接
　　3，3，1平皿移接，培养基制各同2，移接时间掌握在菌丝生长旺盛期进行，挑选菌丝生长粗壮，均匀，扇形毛头整齐，无杂菌的平皿为移接皿，用接种刀割取菌落较凸出部位近菌丝末端（即顶端）约3～5毫米小块置于待接平皿中心，按前法包扎培养，重复1～2次。3，3，2试管移接，经平皿移接教次，观察菌丝已恢复生机，长势稳定后，挑选最优平皿作移接材料，将菌丝块移至试管保存，（保存用PDA培养基为或PSA加入磷酸二氢钾，硫酸镁缓_冲盐）或作生产用种使用。