霍乱弧菌知识大全

春雨菌业

霍乱弧菌的检测　　1.涂片检查：取新鲜送检标本涂片2张，干燥后，用乙醇或甲醇固定，分别用革兰染色剂1：10稀释的石碳酸复红染色，用油镜检查，观察有无革兰阴性呈鱼群排列的弧菌。
　　悬滴检查：取患者粪便，制成悬滴标本或圧滴标本，检查细菌的动力，霍乱弧菌古典型和EL-Tor型常呈穿梭状及活泼的活动，在悬滴涂片中加O1群霍乱弧菌诊断血清后，在显微镜下观察，若原运动活泼的现象停止，为制动试验阳性。
　　2.培养：取疑似患者粪便直接接种于碱性蛋白胨水中，进行增菌，同时划线接种于碱性琼脂平板或TCBS平板及血液琼脂平板，孵育于35℃。增菌培养孵育6h后，取表面菌膜移种于上述平板上，进行分离培养，并同时涂片，革兰染色和悬滴标本，检查形态及活动力。
　　各种分离培养的平板在孵育18~24h后观察菌落，挑取可疑菌落，先与生理盐水混匀，观察有无自凝现象。再用O1群霍乱多价血清做玻片凝集试验，立即出现明显凝集者为阳性，有条件者再做血清分型。
　　如在选择培养基生长典型菌落，运动活泼呈穿梭状，氧化酶阳性的革兰阴性弧形菌并与霍乱多价诊断血清凝集者，可判定为O1群霍乱弧菌。在霍乱流行期间，根据上述结果并结合临床即可对病人作出霍乱病的早期诊断。并立即向当地疾控部门报告信息。
　　注：霍乱弧菌诊断血清试剂的使用方法
　　于洁净玻片上滴1滴血清，然后取少量被检菌落与血清混匀，轻轻摇动玻片，1分钟内肉眼判断结果，试验应以生理盐水做阴性对照。
　　检验结果的解释：于1分钟内呈明显凝集者为阳性，呈均匀浑浊者为阴性。
　　
霍乱弧菌检验流程 　一、采样
　　(一)水样便采取1-2毫升，成形便采取指甲大小的粪量。病人呕吐物、沾染粪便的衣物、尸体的肠腔和口腔内容物亦可做为检材;
　　(二)外坏境样本可采取病人的污染衣物、剩饭菜、可疑食品、抹布、污水、坑塘水、井水、公厕粪便、苍蝇等;
　　(三)按1：10比例置入碱性蛋白胨水增菌液中，迅速送往实验室。
　　二、增菌、培养
　　(一)所有粪便标本都应经过增菌，尤其是恢复期病人、带菌者或用过抗菌药物的病人标本含菌量少，单靠直接分离不易检出。需经碱胨水37度增菌6-8小时后分离(夏日可将运送时间计算在内);
　　(二)标本含菌量少时，为提高检出率可实行2次增菌，取第一次碱胨水增菌后的培养物表层液0.1-0.2毫升，接种于8-10毫升的碱胨水中，37度培养6-8

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