灵芝深层发酵菌丝体的生产工艺

春雨菌业

   灵芝工业生产灵芝是利用发酵工程方法湖活的菌丝体及其菌丝体所产生的代谢产物。在发酵过程中首先要得到灵芝菌丝体，而要使灵芝菌丝体大量繁殖除必须供给营养与适宜栽培条件外，还压迫一定规模发酵（培养）容器及其通气系统的配套装备，称为发酵设备。用以这发酵设备生产灵芝菌丝体及其产品。

       灵芝深层发酵的生产工艺与抗菌素的生产工艺流程基本相同。灵芝的深层发酵工艺流程

      斜面培养→摇瓶种子→种子罐→繁殖罐→发酵罐。

      （一）斜面培养

      灵芝斜面菌种来自组织分离培养获得的菌丝体，培养在试管斜面培养基上称为斜面菌种。

      （二）摇瓶种子培养

      1.培养基    （玉米粉1 蔗糖2 蛋白胨0.2 酵母粉0.3～0.5 磷酸二氢钾0.1 硫酸镁0.06 PH自然）

      2.培养方法  将长好的以及种子瓶种子倾入扩大瓶培养液中，培养2～3天，接种量以5%～10%为宜。

      3.培养设备  摇瓶机有往复式和旋转式两种。

      4.移种标准  由扩大瓶培养的种子进入种子罐之前，摇瓶的菌种应严格检验，菌种的好坏是发酵成败的关键。

      （三）种子罐培养

      种子罐培养一般分一级种子罐、二级种子罐、三级种子罐。接种量：一级种子罐1%5%；二级种子罐15%～20%；三级种子罐20%～30%。

      从种子罐转入发酵罐，其种子液由稀变稠，菌丝体或菌丝球由少变多，镜检见到菌丝体粗壮，细胞内充满原生质，分布均匀，菌丝体处在生长旺盛阶段。

      （四）发酵罐培养

      （1）菌体形态：灵芝菌丝上无明显“芽头和锁状联合”，菌丝变细，菌丝原生质凝集，少数菌丝有自溶现象。

      （2）含量：灵芝菌丝重量15%～20%（湿重），粘度下降，活性成分含量达到要求。

      （3）发酵周期：灵芝菌丝深层培养时间控制在96小时左右。

      （五）发酵终点的判断

      发酵末期，灵芝菌体生长缓慢，菌体细胞衰老进入自溶，菌体分泌能力也下降或停止，发酵产生的生产能力也随之下降或停止。如果继续延长培养时间，既浪费人力和物力，又消耗动力，造成产物成本的增加，也影响到产品质量。

      确定放罐的指标有：菌体形态，菌丝含量，产物的产量，碳、氮消耗，PH值变化，过滤速度和发酵液粘度等。

      （六）深层培养过程中代谢变化曲线

      灵芝深层培养过程代谢变化的曲线，可反映出不同生长阶段代谢变化的情况，并采取适宜的措施，以提高产量和质量，并依次变化规律作为判断发酵终止的依据。

      以灵芝菌丝量为目的产物时，发酵终点应控制在72～84小时放罐较为适宜。当以灵芝三萜酸为发酵目的产物时，当菌体生长达到平衡后，灵芝酸才大量形成，其最高峰在80小时左右，而后，灵芝酸浓度下降。所以，必须掌握好发酵终点。

      灵芝菌丝在发酵罐中完成灵芝菌丝液后，要进行放罐，处理方法有两种：一是以有效成分为指标，按有效成分中的多糖或三萜类等物质的提取方法进行处理；二是以全液浓缩、烘干制成干物质供药用或将发酵液浓缩、经喷雾制成灵芝发酵精粉。主要用来作为康复产品、医药产品原料。尤其适合癌症患者服用。