某工厂摇瓶菌种死亡或不生长原因分析
某工厂摇瓶菌种死亡或不生长原因分析
摇瓶菌种是从试管母种到发酵罐培养的中间阶段。成品率的要求同试管母种一样，是要求必须100%的。 一般来说，摇瓶菌种的培养相对于发酵罐培养来说，环境优良，影响因素明确，可控性强，是比较简单的。 正是因为简单，往往在操作中疏忽某些因素和变量，长久持续的做精做好就不容易。 平时注意做好基础功夫，学习一种分析问题的思路，比直接得到标准答案 更能学到知识。
下面介绍作者参与分析某厂的具体事例，摇瓶菌种不成活的问题，分享一下分析问题的思路。某厂是应用液体菌种进行黑木耳菌包工厂化生产。日产10万袋，平均日制作发酵罐3罐。菌种技术员有一定的基础知识和生产经验，前期该厂，摇瓶菌种已生产两个来月，制作摇瓶200来瓶，全部正常。 而在3月初期，前后相隔不久，有两天的摇瓶，发现摇瓶菌种异常，接种块不成活。因为是摇瓶菌种，事关重大，需要紧急解决问题。 经仔细询问，一起探讨，把所有的相关因素全部排查，排查环节和改变方案如下:1 试管母种，操作标准，检查严格，确定本身无污染。硅胶塞封口 冰柜存放两个月，活化时有遇30多度高温，或者有冷凝水。 检验方案:马上制作一批细菌检测试管，转管培养，同时，把转接摇瓶以后的剩余试管28度恒温培养观察。 2 配方，无改变。水，重测pH值。pH7左右，中性微酸。3培养基装瓶方法正确无误。棉塞方面，棉塞重复使用，有嫌疑。拆开棉塞观察，棉花洁净，干燥。松紧合适。 棉塞问题，大概排除。为保障起见，每批换新棉花，重做新棉塞。4 灭菌，排气基本能保证彻底，冷却阶段，不十分确定，因人员紧张，忙于别事，有自然降压到零，瓶内形成负压倒吸的可能性。 改进计划是:仍旧执行老工艺:排冷气5分钟，灭菌结束后，人工值守降温，锅内略有压力时，缓慢泄压放气，绝对保证内部微正压，严禁负压。5 接种设备。超净台，初期检测合格，超过一个月未做杂菌检测，超过一个星期未做全面擦洗消毒。 此处是风险因素之一，改变办法是:每次操作结束全面酒精擦洗一次，结合紫外线照射消毒30分钟，一个星期做一次 平板检测。 立刻做平板检测，动态下，做2个批次平板检测，结果: 菌落合格。6操作手法。程序无改变。但有遇突发情况，当时没注意。有几天气温升高，实验室室温较高;操作手法也有细微改变，接种工具消毒时间可能有延长，而冷却时间没有相应延长，有造成烫伤菌种的可能性。 改变办法是:延长在无菌环境下的工具冷却时间。确保冷却完全。7 操作不规范或工具消毒不彻底造成的污染:可能性极微。不萌发的培养液pH正常，气味无异常，无异味。因污染造成抑制菌种的可能性也较低。8 同期制作3瓶，有一瓶萌发正常，间接说明母种正常。未萌发的菌种块表面光滑，无菌丝生成，颜色乌黑灰暗同斜面培养基一个颜色。 转接细菌培养基检测的菌种样品，和剩余菌种培养，萌发正常，菌种本身的原因基本排除。 但为保障起见，立刻转接新试管，冰柜保存的菌种，控制在两个月以内。9 培养:有高温现象。因气温升高，室温也相应升高，加温空调测温不准，室内实际气温短期内超过30余度，实测摇瓶间隙，和培养液温度更高 是不利因素之一。 改变办法是:把恒温室加热空调关闭，或维持在室温20度，仍用恒温箱，培养温度严控在适宜培养温度。10 培养环境:每天消毒液擦洗地面，定时紫外线照射，加强培养室和实验室环节消毒。 分析结果，主要怀疑接种工具和冷却不彻底而烫伤菌种。但同时其他环节也有相应风险因素。因为生产紧迫，没法做单因素分析，只能综合改进。按改进后的程序，继续做几十个批次，完全正常。
温馨提示
相关 阅读
菇友液体菌种发酵罐深得外国友人青睐
100本《菇友技术汇编》寻找有缘人
中国农大生命科学研究中心为什么认准菇友液体菌种发酵罐？
黑木耳大地管理标准化流程
通过菇友公众号发布供求信息的绝招
液体菌种检测标准
已经被杂菌污染的工厂化菌包厂消毒杀菌处理方案
黑木耳液体菌种生产技术标准化流程
黑木耳菌包场石膏采购标准
让人费解的黑木耳大地养菌技术
黑木耳菌包厂螨虫污染问题处理参考建议
面包菌（白腐真菌）-黑木耳生产常见病虫害介绍
曲霉－黑木耳生产常见病虫害介绍
根霉－黑木耳生产常见病虫害介绍
链孢霉－黑木耳生产常见病虫害介绍
蓝绿菌－黑木耳生产常见病虫害介绍
青霉－黑木耳生产常见病虫害介绍
绿霉-黑木耳生产常见病虫害介绍
食用菌菌包生产中潜在的安全隐患
香菇烂棒的原凶－食用菌虫害不得不防
菌包厂层流罩质量标准
生产枝条菌种的小窍门和注意事项
董老师讲述食用菌产业未来发展方向齐学刚老师精典讲义食用菌行业潜规则
食用菌菌种袋选择的方法
木屑（锯沫）质量标准及检验方法
接种箱使用注意事项黑木耳菌棒“黑皮病”的成因与防止措施
链孢霉正确预防措施和治疗方案
秋耳种植标准化技术流程
黑木耳虫害防治方案大全
黑木耳晒袋的原则优秀食用菌技术员需要具备的七项素养标准
全光地摆小孔木耳催芽技术流程
大棚吊袋木耳出耳期管理技术要点
下地后的螨虫危害、糊巴口、风干口应急处理方案
黑木耳杂菌袋、”死袋“再利用的方法(简介)
菇友有奖征文启事秋耳春管技术要点
《黑木耳种植技术500问》欢迎大家提问！
天麻人工授粉技术（视频）
黑木耳下地出耳管理技术
液体发酵罐接种（视频）
解析食用菌菌种萌发不吃料的原因
黑木耳开口前、后的注意事项
《食用菌智库》－内测版欢迎大家献计献策菌种提纯－黑木耳制种技术（三）
不是所有的蜜环菌都配称为“榛蘑”
组织分离－黑木耳制种技术（二）
线虫对黑木耳危害简介
如何开发与利用野生菌类资源
采集种耳-黑木耳制种技术(一)
灵芝盆景大菌包制作注意事项
黑木耳大棚吊袋催芽新技术
秋耳生产螨虫危害预警蜜环菌(榛蘑)原种生产流程
后发治人的“面包菌” 及应对措施
推荐 阅读
警惕有人用核田头菇菌种假冒猪苓纯菌种
导致黑木耳菌包生产失败十个细节
《食用菌技术人才信息库》诚邀有实之士自主报名登记人螨为患-关于螨虫的三大误区
羊肚菌出菇刺激方法
做黑木耳的秘密武器——增耳肽
菇友有奖征文启事
食用菌科研、生产必备十大神器(强烈推荐)
2018－2020年食用菌产业发展战略与战术
木耳养菌期间的管理方法和注意事项
食用菌菌包培养期间常见杂菌名称、图谱(一)
珍稀食用菌栽培和制种培训班招生通知
食用菌双膜出菇技术
黑木耳遭遇螨虫危害的补救措施
预防螨虫的三大重要环节2018年食用菌螨虫危害高发预警黑木耳菌种封口的注意事项
灵芝盆景嫁接技术（视频）
灵芝盆景用大菌包的制作方法（视频）
增耳生物活性肽与其它肽使用效果对比照片食用菌病毒及菌种脱毒技术研究概述
关于黑木耳菌种早熟、中熟、晚熟的误区
2018年黑木耳行情预测－投票
春雨菌种研究所－菇友诚信企业展播
黑木耳螨虫的危害与防治－季占军老师现场录音综述黑木耳原种（二级菌）生产流程及注意事项黑木耳装袋机的革新进展一览（视频）
栽培天麻、猪苓用密环菌菌材繁育注意事项
根据用途不同选择相应的灵芝品种
食用菌枝条菌种制作新工艺
长棒黑木耳菌包工厂化生产简介-菇友首创
春耳秋管开顶增产技术黑木耳养菌室正却消毒、防虫流程
关于黑木耳的出售的几点策略（精典）
黑木耳耳片变黄的原因以及防治方法
黑木耳菌棒防治青苔先治水
井水水锈的起因与解决方案
青山谈黑木耳西阳病的防治（值得参考）
黑木耳西阳病成因与防治措施
木耳催芽过程中憋芽、鼓包的成因和解决方案东北地区羊肚菌栽培生产日程规划食用菌菌种目录大全
为什么我的木耳感染杂菌了？食用菌的隐形杀手-病毒
食用菌菌种脱毒技术汇总菇友微平台面向广大菇友征文黑木耳菌包生产成败的十大细节麦麸、豆饼、米糠在培养料中的代用比例食用菌常压灭菌需要注意的问题曲霉－黑木耳生产常见病虫害介绍
万水千山总是情，点个 “好看” 行不行！！！
页:
[1]
