菌种制作

邹城市食用菌

  
固体菌种（母种、三角瓶原原种、原种、栽培种）生产工艺及操作规程

（一）斜面菌种：试管种（母种）
  1、培养基：
（1）配方：标准PDA粉
（2）制作方法：称取200g（去皮土豆），加水1000ml，加热烧开后20分钟，及可八层纱布过虑调制到1000ml温度维持在100℃加入20g（干重）预先50℃温水浸泡20分钟的琼脂条，琼脂完全融化后四层纱布过滤，维持80℃加20g 葡萄糖完全融化后分装至试管中，装入量为试管刻度的1/5，塞好棉塞，7支试管一捆用牛皮纸包扎好。
（3）灭菌：采用高压蒸汽灭菌法，压力0.05Mpa放辆次冷气，压力0.1-0.15Mpa维持30分钟。
  2、接种：按照灭菌操作规程，挑取0.5*0.5cm大小的菌种块于试管斜面中央。
  3、培养：（暗培养）
（1）培养房间：1号菌种室。
（2）培养温度：23～25℃
  4、培养时间：15天
（二）基质菌种：三角瓶（原原种）
  1、培养料：
（1）原材料及配方：木屑1.71Kg，米糠0.26Kg，麸皮0.14Kg玉米粉0.06Kg水0.5Kg，制20瓶三角瓶。
（2）制作方法：将以上原材料拌和后加水拌匀装到150 ml的三角瓶内，每瓶装料90g，高度在120ml的刻度线上即保证装料松紧度的一致，然后揿平，打洞至底，清洗，塞好棉花用纸包扎好。
（3）灭菌：采用高压蒸汽灭菌法，压力0.05Mpa放辆次冷气，压力0.1-0.15Mpa，时间90分钟。
  2、接种：按照无菌操作规程，将发满菌的斜面试管菌种，取它的最终佳菌段，去掉部分的培养基，均等地分为五份，将其中的一份挑至瓶的洞内至底，再一份盖洞口，将其余三份均匀地覆盖在三角瓶的面上。
  3、培养：（暗培养）
（1）培养地方：1号菌种室。
（2）培养温度：23～25℃
  4、培养时间：25天
（三）原种
1、培养料：
（1）原材料及配方：木屑60%，米糠23%，麸皮12%玉米粉5%水62%，制128瓶。
（2）制作方法：将以上原材料拌和后加水拌匀装到1100cc瓶内，每瓶装料700g，料面跟瓶口距离1.5cm即保证装料松紧度的一致，打洞至底，清洗，加瓶盖。
（3）灭菌：采用高压蒸汽灭菌法，，压力0.1-0.15Mpa。采用高压杀菌法。杀菌时间与温度如下：
           灭菌前        抽空2次
           100℃         40分钟
           115℃         20分钟
           121℃         45分钟
           灭菌后         抽空3次

  2、接种：按照无菌操作规程，将发满菌的三角瓶菌种，取它的最终佳菌段，在酒精灯火焰上处理三角瓶表面的气生菌和接种快，三角瓶接到瓶子是菌种必须落到瓶底，菌种铺盖瓶口。
  3、培养：（暗培养）
（1）培养地方：2号（3号）菌种室。
（2）培养温度：23～25℃
  4、培养时间：40天
5．菌种管理
每批原种每隔5天检查发菌状况并做记录。
（四）栽培种
1、培养料：
（1）原材料及配方：木屑60%，米糠23%，麸皮12%玉米粉5%水62%，制128瓶。
（2）制作方法：将以上原材料拌和后加水拌匀装到1100cc瓶内，每瓶装料780g±10g（含瓶和瓶盖），料面跟瓶口距离1.5cm即保证装料松紧度的一致，打洞至底，加瓶盖。（用自动装瓶机装）
（3）灭菌：采用高压蒸汽灭菌法，，压力0.1-0.15Mpa。采用高压杀菌法。杀菌时间与温度如下：
           灭菌前        抽空2次
           100℃         40分钟
           115℃         20分钟
           121℃         45分钟
           灭菌后         抽空3次
（4）搅拌：加水前15分钟
          加水后20分钟

  2、接种：自动接种机接
  3、培养：（暗培养）
（1）培养地方：2号（3号）菌种室。
（2）培养温度：23～25℃
  4、培养时间：40天
5．菌种管理
每批原种每隔10天检查发菌状况并做记录。