食用菌麦粒培养基菌种打孔固定培养技术

春雨菌业

常规生产麦粒菌种时，一般都不对菌种瓶中的麦粒培养基进行固定，装有麦粒培养基的菌种瓶在灭菌、接种和搬运过程中如不能保持竖立状态，麦粒培养基容易与棉塞接触，并将水分传导至棉塞和封口纸，使棉塞和封口纸潮湿。潮湿的封口纸和棉塞极易遭受外界杂菌的侵染，使杂菌能通过封口纸和棉塞的阻隔进入菌种瓶而污染麦粒培养基，因此菌种的杂菌污染率较高。另一方面，由于接种时菌种只能接种在麦粒培养基表面，菌丝只能从上往下长，培养时间较长，能源消耗量大，不但增加了制种成本，也增大了杂菌污染的机率。　　笔者在进行麦粒菌种制种实践中摸索出一套新技术，即对瓶装麦粒培养基进行固定，防止麦粒培养基在菌种瓶侧放时与棉塞接触，并在麦粒培养基中间打一通气－接种孔直达菌种瓶底部，接种时同时在通气－接种孔底部和麦粒培养基表面接种菌种。
　　与常规制种方法相比，麦粒培养基被固定在菌种瓶中后，在灭菌、接种和搬运过程中将菌种瓶侧放时，菌种瓶中的培养基不会发生移动，培养基和棉塞不能相互接触，避免了培养基中的水分通过接触而传导至棉塞，使棉塞和封口纸始终能保持干燥状态。因杂菌孢子不可能在干燥的封口纸上萌发，这样棉塞和封口纸就能对空气中的杂菌孢子发挥阻隔作用，有效防止培养基受杂菌污染，麦粒菌种的杂菌污染率由3%以上降至0.2%左右。
　　在培养基中间打有通气接种孔，便可将菌种同时接种在培养基底部和上部，菌种在培养基的上下层同时萌发生长，既可省去老法制种中摇动培养基来分散菌种的工作，又达到缩短培养时间和降低能耗之目的，使菌种在温室的培养时间缩短约1/3，温室培养过程中的能源消耗节省近1/3。
　　现将食用菌麦粒培养基打通气-接种孔固定培养技术介绍如下：
　　一、麦粒培养基的制备
　　1、麦粒培养基的配方：小麦粒99%，碳酸钙1%。
　　2、麦粒培养基的制作和装瓶：小麦粒淘洗干净后用清水浸泡12小时，然后沸煮15分钟，捞出摊开晾干表面水分后拌入碳酸钙并装入菌种瓶，一般装至瓶肩以下1.5－2cm即可。
　　二、麦粒培养基的固定和打孔
　　1、固定用料的配制
　　固定用料采用木屑培养基，其配方为：阔叶树木屑78%，麦麸20%，蔗糖、石膏粉各1%，水适量。原料按比例混合均匀，加水量掌握在用手紧握木屑培养基时手指缝间有水渗出但不下滴的程度为宜。
　　2、麦粒培养基的固定方法
　　在菌种瓶的麦粒培养基上面装满木屑培养基，然后用扁铁钩向下压实、整平。木屑培养基用量以压实、整平后刚好达菌种瓶的瓶肩部为宜。
　　3、在麦粒培养基中打通气－接种孔
　　用直径1.2－1.5的尖头圆木棍从培养基表面中间向瓶底打一通气－接种孔。打孔需反复多次才可打成。第1次打孔后再向瓶中装入少量木屑培养基，并用打孔棍边打孔边拨入孔中。每次打孔后退出木棍时边旋转边退，避免将孔壁上的培养基拉松。如此反复3－4次，直至培养基中间形成由木屑培养基构成的较牢固的孔壁。最后再用扁铁钩对培养基表面稍加整压。
　　4、菌种瓶的清洗和封口
　　将菌种瓶瓶口向下斜放入清水中，清洗瓶外壁和培养基以上的瓶内壁上附着的木屑培养基。待瓶口水分干后在瓶口上塞入棉塞，并用牛皮纸包扎瓶口。
　　三、培养基的灭菌
　　将瓶装麦粒培养基装入高压蒸汽灭菌锅内灭菌，在1.5Kg/cm2压力、121－126℃的温度下灭菌2小时。
　　四、接种和培养
　　在接种箱内接种。接种时挖取花生粒至蚕豆粒大的菌种块，分别接种到处理通气-接种孔底部和培养基表面。接种后置于温室中在27℃的恒温下培养，15－18天后菌丝即可长满全瓶。
　　五、适用范围
　　此法适宜于进行瓶装的食用菌麦粒菌种制种。塑料袋装的麦粒菌种因塑料袋外壁柔软，固定好的麦粒培养基易在灭菌、接种和搬运过程中因碰撞、挤压而变形，难以保持固定状态，因此不适用此法制种。