桑黄优质菌种的培育制作

春雨菌业

　　桑黄，是一种多孔菌科、木层孔菌属真菌，是一种名贵中药，一种多年生的药用真菌。现代研究证实桑黄多糖能够缓解疼痛、食欲不振、体重减轻及疲劳倦怠等癌症特有的症状，提高生活品质。然而，在我国境内的优质桑黄菌非常有限，远远供不应求，况且人们对桑黄本身的质量药性追求很高，需要有更高品质的桑黄菌。通过对桑黄菌种的优质培育和栽培技术研究，高品质的桑黄菌能够成功栽培出来，为人所用。

　　菌种的优劣直接关系到产品的质量与产量的高低。菌种的质量包括菌株的生物学特性和菌种的纯度两个方面。

　　一 菌种分离

　　桑黄菌种分离包括菌木分离、组织分离、孢子分离等多种方法，每种方法都可以获得桑黄菌种。一下是野生桑黄组织分离法：

　　1.桑黄子实体的处理：取桑黄子实体，用干净刷子刷去表面杂质，再用酒精擦洗外表面进行消毒，放入无菌烧杯中备用。

　　2.组织分离：将已经备好的子实体放入到接种箱内，准备好建剖刀、酒精灯、母种斜面培养基、镊子、刀片等工具，一起放入接种箱内，进行杀菌操作，确保整个过程保持在无菌环境下。灭菌结束后，取子实体最好部位菌丝快，转接移入到母种斜面培养基表面，全部操作完成后，即可放入母种发菌区，发菌。

　　二 菌种制作

　　利用菌种分离出第一代菌丝体，扩大繁殖而成的试管斜面菌种，称为母种（一级种）。母种体积小，易存放。将母种的菌丝体移接到玉米粉等培养基上，经栽培而成的瓶（袋）菌种称为原种（二级种）。用原种扩大繁殖直接用于栽培的菌种，称为栽培种或生产种（三级种）。

　　1.母种（一级种）制作

　　母种培养基：①马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基(PDA)：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克（夏天22-23克，下同），水1 000毫升。②CPDA培养基(甲)：马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾(KH2PO4)3克，硫酸镁(MgSO4)1.5克，维生素B1、B2各10毫克，琼脂20克，水1000毫升，③玉米粉培养基：玉米粉50克，琼脂20克，葡萄糖30克，磷酸二氢钾(KH2PO4)1克，硫酸镁0.75克，维生素B1、B2各10毫克，水1 000毫升。

　　桑黄母种制作流程：母种培养基选择→配制母种培养基→培养基装管灭菌→冷却→接种→培养→质量检查→桑黄母种。

　　2.原种（二级种）制作

　　原种培养基：①阔叶硬杂木78%、麦麸20%、糖1%、轻质碳酸钙1%。②杂木屑50%、棉籽壳25%、麦麸20%、玉米粉3%、糖1%、轻质碳酸钙1%。③棉籽壳85%、麦麸10%、玉米粉3%、糖1%、轻质碳酸钙1%。④玉米淀粉50%、棉籽壳30%、麦麸10%、玉米粉7%、过磷酸钙1%、糖1%、轻质碳酸钙1%。⑥甘蔗粉48%、杂木屑30%麦麸15%、豆粉5%、糖1%、轻质碳酸钙1%。

　　三 桑黄原种制作流程

1.原种培养基的配制：选择好最适培养基配方，按配方先将干原料轻轻搅拌混合，再混入水，将干料和水搅拌均匀混合在一起。经验上的分析，含水量可以用手攥紧团撵得方法，攥撵时指缝间似有水滴又不滴水，这时的含水量适宜，搅拌均匀后准备装袋。

　　2.原种培养基的制作：搅拌好了以后，用装待机将培养基装入到聚乙烯筒袋里，用扎口机扎好，并且检查是否有破洞，如有用胶带封口。

　　3.原种培养基的灭菌：装好后进入灭菌阶段，一般常压半天时间，高压2—3小时就可以将培养基移出到接种室内。

　　4.原种菌种的接种：等原种培养基冷却后将接种室内环境灭菌，在无菌环境下将母种菌丝接入到原种培养基内，最后培养原种。

　　5.原种菌种的质量检查和储存：每一个原种菌种制作好以后，需要一段时间的发菌观察期，通过质量检查筛选后，保留储存优质桑黄原种菌种。

　　四 栽培种（三级种）制作

　　1.培养料配方：

　　①食用菌废料50%、棉籽壳30%、麦麸15%、玉米粉3%、石灰1%、轻质碳酸钙1%；

　　②玉米芯50%、棉籽壳30%、麦麸10%、玉米粉8%、石灰1%、轻质碳酸钙1%；

　　③阔叶硬杂木50%、棉籽壳30%、麦麸18%、石灰1%、轻质碳酸钙1%；

　　④杂木屑40%、稻草粉40%、麦麸15%、玉米粉3%、石灰%、轻质碳酸钙1%。

　　2.拌料：按灭菌灶容量多少配方比例计算取各种培养料，拌料时先将原料干料拌匀，再将糖溶于水中后拨入，翻拌均匀，无成团结块现象。含水量达到60%—65%左右，切忌原料过湿或太干。用手撰料成团，指缝似滴不滴水为宜，搅拌好后即可用装待机装袋了。

　　3.装袋：培养料配制后立即转入装袋工序。菌袋可选用15厘米×35厘米规格或17厘米—33厘米规格的聚丙乙烯或聚乙烯筒袋，一般每袋装料450克左右。规模化生产主要采用装袋机装袋。装袋机每小时可装400-500袋，一台装袋机配7人为一组，其中铲料1人，递袋1人，捆扎袋口4人。男女均可。现可选用全自动装袋机，机器换人可成倍提高效率。

　　4.灭菌：灭菌工作做得好坏，直接关系到培养基质量和杂菌污染率，必须注意以下5点：

　　①及时进灶：当培养料拌湿后，酵母、细菌活性增强，加之配料处于气温较高季节，培养料营养丰富，装入袋内容易发热，如未及时转入灭菌，酵母、细菌加速增殖，将基质分解，导致酸败。因此，装料后要立即进灶灭菌。

　　②合理叠袋：量大采用大型罩膜灭菌灶，一次容量3000袋，灶的四角采用井字形，中间采用互连井字形排列，这样就可防止塌棒且蒸汽通畅。但内面要留一定的空间，让气流正常运行。叠好后罩紧薄膜，外加罩布，四周用沙包压紧，以防蒸汽冲力把罩膜冲飞。

　　③温度指标：烧火后，立即旺火猛攻，使温度在4小时内迅速上升到100℃。以防止升温缓慢引起培养料内耐温的微生物继续繁殖，影响培养料质量。保持温度100℃灭菌20-24小时，中途不停火，防止“大头、小尾、中间松”的现象。

　　④卸袋搬运：达到灭菌要求后，转入卸袋工序。卸袋时应套上棉纱手套以防蒸汽烫伤，如发现袋头扎口松散或袋面出现裂痕，随手用纱线扎牢袋头，胶布贴封裂口。卸下的袋子用板车运进冷却室内，车上要铺麻袋，上面遮薄膜，防止刺破料袋和雨水淋浇。

　　5.接种：冷却后，放入到接种室内，准备接种。接种环节是菌棒制作中最为关键的一环。在整个接种过程都必须严格按照无菌操作要求进行，做到严和快，以减少杂菌污染。接种可用接种箱，也可全开放式接种，包括消毒、打穴接种和套外袋等环节。最终将优质的桑黄原种菌丝接种到栽培种培养基里，控制环境温度等，接种完成后，小心轻放，转移到培养房内。

　　6.栽培种菌种的培育管理及检查：根据桑黄菌生长的环境条件，控制好培养房内的环境，尽可能的控制在菌丝最适生长环境下，使菌丝能更好更有的成长，并且仔细检查和筛选，最终培育出优质桑黄菌。