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羊肚菌母种培养基配方、制作方法及注意事项

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发表于 2021-9-14 09:50:41 | 显示全部楼层 |阅读模式
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  一、母种的制作

  1、培养基配方

  黄豆芽500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,羊肚菌基脚~50克,水1升。

  黄豆芽500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,水1升。

  栎木屑500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,水1升。

  马铃薯200克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,蛋白胨0.5克,牛肉膏0.5克,水1升。

  蛋白胨1克,葡萄糖20克,琼脂20克,酵母膏1克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁1克,维生素B1,1克,水1升。pH值自然。

  上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水1升煮30分钟,过滤取汁,并将余下的水补足1升,加入其它原料,煮至溶化后,按母种制作常规方法,分装于18毫米×180毫米或20毫米×200毫米试管的1/5,塞上棉塞,使用高压灭菌锅彻底灭菌;在0.68千克压力下维持60分钟,自然冷却至指针回到原位才可打开,放成斜面备用。

  2、菌种分离
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  (1)分离方法

  羊肚菌分离需要一种助生菌与羊肚菌菌丝共生时才能出菇,这种助生菌长期活动在土壤中,有时以芽孢菌形式出现,它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。因此从土壤中分离该菌比其它任何方式分离要好些,初学者可在有资质,信誉好、品牌好的单位或个人处引进培养好的羊肚菌优良母种。

  (2)操作过程

  在羊肚菌生长的周围,可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易成功。

  浸提分离法:将基脚土用无菌水稀释,澄清后用接种针蘸取少量溶液,滴到试管内的空白培养基上,塞上棉塞后取出培养。分离后,放在12~18℃温度下培养观察。一旦菌种分离成功,在以后的转接过程中要小心,不能再让杂菌感染,必须把好高温灭菌关和接种消毒关,才能保证菌种质量和成活率。

  3、转接提纯

  待培养基表面余水干后才能使用,否则会被细菌感染。接种要求在接种箱内通过药物灭菌进行,将第一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基,放入空白培养基上,每支母种可接10~15支,母种只能扩种一次,不能多接或多扩,否则会影响子实体生长。

  4、培养

  接种后放在18~22℃温度下避光培养,2~3天菌丝萌发,7天可长满斜面培养基。

  二、原种制作

  1、培养基配方

  栎木屑50%,棉籽壳30%,麦麸15%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土2%,pH值自然。

  栎木屑75%,米糠或麦麸20%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土2%,pH值自然。

  稻草粉70%,麦麸25%,石膏1.5%,过磷酸钙1.5%,土2%,pH值自然。

  棉籽壳90%,木屑8%,土2%,pH值自然。

  玉米芯50%,木屑30%,米糠15%,石膏1%,过磷酸钙1%,土3%,pH值自然。

  2、操作过程

  按配方将原料混合均匀,加入清水,使含水量达65%时装瓶。装瓶要求松紧一致,装瓶后塞上棉塞封口。

  3、灭菌

  高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时,常压灭菌在100℃温度下保持6~8小时。

  4、接种与培养

  接种在接种箱内经消毒后,每支母种可接种原种5~10瓶。接种后放在18~22℃温度下避光培养,培养期间尽量避免强光刺激,菌龄以不超过50天为好。

  三、栽培种制作

  1、培养基配方

  栎木屑75%,米糠或麦麸20%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土2%,pH值自然。

  棉籽壳75%,麦麸20%,石膏1%,过磷酸钙1%,土3%,pH值自然。

  稻草粉75%,麦麸15%,过磷酸钙2%,土3%,pH值自然。

  玉米芯80%,米糠15%,石膏2%,过磷酸钙1%,土2%,pH值自然。

  农作物藤秆粉75%,米糠10%,麦麸10%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土2%,pH值自然。

  2、操作过程

  按配方将原料混匀后,加水调至含水量为65%,装瓶,灭菌接种,培养,操作方法同上述原种。经1个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。
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