木屑菌种的制作－《黑木耳种植技术》第二章 第一节

春雨菌业

                                                                                                

第二章  黑木耳菌种的制作

在所有的食用菌生产过程中，都会涉及到菌种的制作这一过程，在菌种制作过程中要遵循以下几个原则：

一、             母种（试管种）尽量不要自己制作，也不要轻易转管，尽量去正规厂家科研单位购买。

二、             购买菌种时要索要发票并留存一支试管备案

三、              原种（二级种）尽量自己制作，在制作过程中要严格无菌操作，严格按技术要求培养。

一、黑木耳菌种的分级

黑木耳菌种从等级上一般分为母种、原种和栽培种三级，以下做详细介绍

1、  母种（试管种）：母种也叫做试管种或一级种，一般以试管做为盛装容器。

2、  原种（二级种）：原种也叫二级种，一般用菌种瓶或塑料袋为盛装容器，从培养基的材料上可分为木屑种、枝条种、谷料种等。

3、  栽培种（出菇袋）栽培种也称为三级菌，也就是最终出菇袋，是以菌袋为主要盛装容器。

注意：黑木耳和别的菇种不一样，属于三级出菇，所以在生产中一般以二级菌作为菌种使用，严禁盲目转代，以免造成损失。

一、木屑菌种的制作

黑木耳生产中最常用到的菌种制作材料就是木屑，木屑菌种以其材料宜得，耐保存，活力强，抗杂性好等特点深受广大种植户的青睐，所以以下重点介绍一下黑木耳木屑菌种的制作方法。

培养料的配制

常用的木屑种配方有：1，木屑78% 麦麸20% 石膏1% 白糖1%；2，木屑80% 麦麸5%  米糠10%  玉米面2%  豆粕2% 石膏1%； 3，木屑80% 麦麸17% 石膏1% 豆粕2%。

在原材料选择上要注意以下几点：

一、木屑尽量选择阔叶硬杂木（无霉变的）

二、木屑要粗细搭配使用

三、麦麸要选择大片，不添加防腐剂的

四、石膏要使用食用石膏粉

拌料：

确定了适合的生产配方以后按配方要求。

进行拌料：具体方法如下：

将主辅料按比例进行称量，一般情况下木屑在购买时、生产中不是特别干，所以木屑一般不按重量进行称量，在东北地区一般传统做法是先把木屑装入80X120的袋子中以袋为标准，一般一袋按60斤干料计算，也可以先做烘干试验然后按比例去水计算重量。

称量好辅料后把麦麸、豆粕、石膏等辅料先混合均匀，然后再拌入备好的木屑中，先干拦两遍，再加水，湿料再拌两遍，如果配方中需要加糖，糖要先溶于水中再拌料。菌种生产一般要求含水量在55%-60%之间，，具体检测方法是：抓起一把培养料用手用力握紧能成团，手上不水渍而不能有水渍出为标准，也可以用两手四个手指用力捏，指逢稍见水渍出就可以了，切记不要含水过大，在菌种生产中拦料要注意以下几点：

一、主辅料称量准确，比例合理

二、拌料一定要均，含水量适中

三、木屑尽量粗细搭配使用，粗木屑要提前预湿

四、高湿季节培养料尽量现拌现用，避免料变酸腐败。

装袋（瓶）

木屑菌种盛装在现在生产中有多种方式，大致分为三种，瓶装、袋装窝口和袋装无棉盖封口，下面依次介绍下三种方式的具体操作方法。

瓶装：瓶装是木屑菌种最早的生产方式，从上世纪六七十年代一直到现在都有使用，这种方式的优点是不易污染，易于管理，转接后成活率高，是目前公认的最安全的菌种生产方式，缺点是：装料费工，盛装量少。

装瓶方法为：

菌种瓶选择：现在的菌种瓶有两种，一种用玻璃的葡萄糖瓶这种瓶比较便宜，但因其瓶口较小所以装料时比较费工，而且接种时一般要破瓶，所以只能一次性使用，所以现在使用量在逐渐减少，另一种是一些物资厂家专门生产的塑料菌种瓶，这种瓶配有专门的通气瓶盖，而且瓶口大小适中，所以近几年逐步取代了葡萄糖瓶，用量逐渐增多，种植户可以根据自己的实际情况选择。

装瓶：装瓶现在据我了解还没有成熟的机器，所以一般采用手工的方式进行，装瓶时一定要注意松紧适度，太松菌丝生长旺盛，容易老化，也不利于水分的保持，太紧培养料透气性差，菌丝生长缓慢，装满瓶后要将料面进行平整，清除瓶口内外的余料，然后在瓶中间打1-1.5CM的通氧口，最后塞上棉塞或盖紧瓶盖，送入灭菌室准备灭菌。

（一）、袋装无棉盖封口的装袋方式

由于菌种瓶生产菌种的种种局限性，从上世纪八十年代以后，广大种植户又发明了装料菌种的生产方式，袋装无棉盖封口就是其中的一种方法，该方式有装袋操作简单、节省人工、单袋盛装量大、转接数量多等优点，正逐渐被广大种植户接受。

盛装菌种的菌袋一般选择规格为15X30或16X33厚度为0.05CM的丙烯或乙烯折角袋，如果是采用高压灭菌一般选择聚丙烯材质的菌袋。，无棉盖一般选择套环直径3.5CM左右，盖体防尘效果好的。最好选择带有防水功能的盖体。

装袋用装袋机和手工都可以，无论选择哪种方式都要注意：装袋松紧程度适中，以单手用力料面稍微下陷为好，菌袋表面和认错部不允许有皱纹出现，料面要求平整，袋料中间要有通气孔，菌袋上部到无棉盖要留有一定距离，方便菌种接入。装袋完毕后搬入灭菌室灭菌。

（二）、装袋窝口生产方式

装袋窝口生产菌种是从木耳三级菌生产中演化而来的一种菌种生产方式，其生产方式和三级菌生产大致相同，其优点表现为机械设备不用单独购买，可以机器大规模生产，中心接种菌丝生长快，菌龄一致。但也存在如隐形污染严重，制种成活率低，转接后成活率不高等缺点，所以在实际生产中要慎重选择。

装袋窝口方式可以直接用装袋机装袋，一般选择15X30厚0.05CM的聚丙烯菌袋进行生产，装袋高16公分左右，装袋后把多于塑料窝入接种口内，然后用塑料空心棒塞紧，倒放在铁筐内搬入灭菌室灭菌。

从以上的介绍中我们可以看出菌种生产中几种方式的优劣：瓶装的优点主要是安全，污染低，但存在大规模生产不易机械化操作，生产浪费人工等缺点，所以此方式适合农户小规模生产应用，袋装无棉盖封口介于两种方式中间，可以用机器大规模生产菌种，所以适合大规模生产中的菌种应用，也可以做为菌种厂出售二级菌的主要生产模式，而第三种模式在生产菌种中对技术环境要求比较严格，所以不建议大规模使用。

灭菌

灭菌俗语又叫蒸锅，是利用蒸气杀死培养料内杂菌的过程，可以分为高压和常压两种方式，在生产中一般农户采取常压灭菌的方式，菌包厂一般采用高压灭菌，下面就把两种灭菌方式详细介绍一下。

高压灭菌

高压灭菌一般需要专业的灭菌设备和很高的专业操作知识，适合大型基地和菌包厂生产菌种和菌包，其有灭菌时间短、灭菌彻底、节约燃料等优点。

高压灭菌常用的设备有：手提式高压锅、卧式中型高压灭菌锅、大型灭菌柜等，种植户可以根据生产需要选择灭菌设备，但要注意，一定要选择正规厂家有生产合格证的产品，在高压灭菌中的具体操作方法如下：

1、    装瓶（袋）：将装好的瓶或袋用铁筐或耐高压的塑料筐装入灭菌容器，注意不可装的太满或太挤，太满或太挤容易影响蒸气流通，从而影响灭菌效果。

2、    点火（送气）：装锅完成后要马上点火或送汽，使菌袋迅速升温，以免培养料变酸腐败。煮沸式高压锅一开始火要大些以保证快速升温。

3、    放汽：放汽也就是排出锅内冷空气的过程，以免造成假升压现象。所以说在高压灭菌中放汽是一个非常重要的环节，直接关系着灭菌的成败。具体操作方法是：当高压容器内压力升到0.05MPa时打开放汽阀将锅内气压排净，然后关闭放汽阀等压力升到0.02MPa时再重复一次，目前也有一些大型灭菌柜上配有真空排气系统，这类设备操作相对简单，只要按照振作规程进行程序输入，电脑就会自动完成灭菌全过程。

4、    保压：当灭菌锅内气压升到0.15MPa时可以保压了，也就是维持这一压力。一般情况下瓶装的菌种要维持0.15MPa的温度1.5小时，袋装的维持2小时。

5、    冷却出锅：保压结束后，要让锅内压力自然下降到0.01MPa，然后打开放气阀排出多余蒸汽，再自然降温到80度以下，打开锅门将菌种搬入灭菌的冷却室冷却。

常压灭菌

常压灭菌就是在标准大气压下利用蒸汽对培养料进行100度左右的灭菌处理，这种灭菌方法设备要求简单同，技术简单易行，是目前菇农应用最多的灭菌方式，但其也有如：灭菌时间长、浪费人力燃料等缺点，常用的设备有灭菌锅、船形灶、蒸汽锅炉等，具体灭菌方法如下：

1、   装锅：将装好的袋或瓶装入铁筐或塑料灭菌筐内，然后码放进灭菌仓内。一次性码放量要考虑灭菌设备的最大灭菌量。

2、   点火升温：常压灭菌要求点火升温时开始要大火猛烧，也就是常说的“攻头”，一般要求在四小时内培养料内温度达到100度，升温时间过长容易引起料内细菌繁殖，引起培养料变酸腐败，从而导致灭菌失败。

3、   保温：从灭菌仓内所有培养料内温度达到一百度时开始到灭菌结束称为保温阶段。这一阶段要求温度要稳，要一直保持这一温度尽量避免温度波动。在灭菌过程中要尽量避免加入大量冷水。菌种灭菌要维持100度的温度10小时以上。也就是说从袋内温度达到100度开始计时到10个小时后结束。

4、   闷锅：在保温结束后不能立刻出锅，要继续闷5小时以上，这一过程称为闷锅，闷锅过程中要注意保温，不要主温度降的太快。闷锅时间也不易太长，原则上不要超过8小时，闷锅结束后将菌袋搬入冷却室冷却。

冷却：

菌种生产最好要配有专门的冷却室，冷却室要求洁净，地面要硬化，墙壁最好粉刷。如果生产量小可以用接种室代替。在放入菌袋前冷却室要彻底消毒，具体做法是在进菌前用10%含量的八四消毒液喷洒消毒后按每立方米5克的用量用菇保烟雾剂进行熏蒸处理半小时，然后搬入菌袋冷却，冷却过程中最好用7克的臭氧机进行消毒处理。

接种：

接种就是把菌种放入到冷却到30度以下的菌袋（瓶）的过程，因为黑木耳菌丝纤细，生长速度慢，所以这一过程要在无菌的环境下严格进行。目前常用的接种方式有：接种箱、超净台、离子风等方式，不管用哪种方式，一定要保证接种环境的绝对无菌，接种时要注意以下几点：

1、  菌袋冷却要保证在40度以下，但也不要太凉，一般要在30度到35度之间就可以。

2、  接种室内要提前降尘并保证室温比袋内温度低2到3度，这样造成内外温差不易感染。

3、  接种速度要快，接种人员尽量不要走动交谈。

4、  接种工具使用之前要用酒精灯消毒，接种过程中不要接触试管口，菌袋外壁接触后要立即消毒。

5、  一支试管转接二级菌不要超过8瓶（袋）接种块大小尽量均匀。

养菌

接种之后就进入养菌期管理了，养菌期主要的工作就是控制温度和调节通风，养菌期直接关系到菌种质量的好坏，可以这样说，好菌种是养起来的。所以养菌期管理特别重要。

菌种进入养菌室头七天要调节袋内温度再28度左右，促使菌丝尽快萌发吃料。可以不通风或少通风。

七天以后把料温降24度左右培养，一直到菌丝长满培养料，在这期间要随着菌丝的生长速度逐渐加大通风量，判断通风量是否合适的标准是，进入养菌室没有明显异味和不舒服的感觉即可。

菌丝长满培养料后要把温度降到十五度左右继续培养十天。

关于养菌期间所有温度指数都要以料温为标准，具体做法是把温度计插入菌袋内部或两个菌袋中间。

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