液体菌培训教材三

邹城市食用菌

液体菌种培训教材（节选三）

2010年4月10日

（三）液体菌种的制作方法

    液体菌种的生产方式可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。
    1.电磁搅拌法比较简单，投资也比较少，200元钱的投资就可进行生产。从接种到菌丝长好要7天时间。但也存在生产量小的缺点，所以生产中常用几个搅拌器同时生产来加以解决。也可以用扩张法来加以解决。主要生产过程：在无菌条件下将试管种接到三角瓶里，搅拌4-7天后得到大量的菌种。

2.摇瓶机法也是一种比较简单的方法，接种简单，管理方便，生产量根据机器的设定而不同。投资要1000-3000元钱。但也存在噪音大等缺点。生产过程：在无菌条件下将试管种接到瓶内，摇动。一般7天左右会出现大大量的菌球。

3.简易深层发酵（吹氧）法相对来说比较麻烦一些，主要是器材的联接要在无菌状态下进行，如果哪个环节出现问题，不能保证成功率。投资也要3000多元。生产过程：在无菌条件下将试管种接到容器内，通气培养7天，得到大量的菌球。

4.发酵罐法是目前要求最高的一种，涉及到好多方面的知识，很难自学成才，而且投资也高，一般要10000元以上。如果你的生产量大或是菌种场，建议你还是用发酵罐比较好。因为生产量大，很快就会把你的投资收回来，而且可以减轻你很多工作量。

发酵罐液体菌种的生产主要过程：专用母种的生产，时间在一周之内。发酵罐接种后，一般品种在三到五天内生产好。时间的长短一是看罐的大小，二是看品种。各有不同。

需要说明的是电磁搅拌器生产的液体菌种是菌丝团，而摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法生产出来的液体菌种一般是菌球。

（四）液体菌种的工艺流程及生产要点

工艺流程图：
              空气压缩→过滤
                         ↓
配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种
                         ↑
     试管斜面种→ 三角瓶液体专用母种
    1.试管种的生产

液体菌种对试管的纯度要求很高。生产前,先要将试管种进行纯化,不然很难生产出液体种。纯化的方法有二种：固体种生产法和菌种提纯法。二者可任选其一。
    2.三角瓶液体菌种专用母种生产

专用母种分固体和液体两种。从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器或摇瓶机进行生产。整个过程要7天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。固体种生产时间要长些，保存的时间也长，而且方便运输。但是，固体专用母种一般污染要严重一些，有的人污染率要达到20-30%左右。我们建议用液体专用母种。
    3.发酵罐生产
    生产时要先进行培养料的配制。配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁，再将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中，也可将免煮培养基或公司提供的培养基直接加入到罐内加热，125℃维持40分钟到一小时左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶专用种接到罐内进行培养，培养时根据不同的菌种，设定适宜的温度。
    培养期间应注意观察菌球出现的时间、颜色和排出气体的气味等，控制好压力。如遇到停电，关闭排气阀来保持罐中处于正压状态。来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。培养过程中，可随时采样分析，几天后待菌球密度符合要求时（从视镜或排料观察），即可接种。
    （五）液体菌种的检测方法

1.菌球的形态：菌种长好后会看到大小均匀、活力旺盛、毛刺明显的大量的菌球，静止5分钟后菌球点菌液浓度的80%以上或不分层。若菌球很少或大小不一，则可能是质量有问题。

2.菌液澄清度：菌液中除菌球外无其它固形物，菌液由前期的微浑浊变得澄清或橙黄色。如变得浑浊不清则很可能是染菌。

3.菌液气味：到培养后期菌液的糖香味会逐渐消失，取而代之的是或有或无的菌种特有的清香味。若有臭味、酸味、霉味则是染菌。

4.不知道是什么：若依以上指标还不能判断菌种的质量，还可将菌种接到空白试管上，放在20-25℃条件下静止48小时左右，若表面菌种萌发明显，且无其它颜色的孢子，则多为正常，若有其它特殊颜色则为污染。（未完待续）